色譜柱常見問題解答

色譜柱常見問題解答
溶解性不好的樣品
      如果樣品不溶于流動相中的有機溶劑怎么辦，按照化學合成人員的溶解性測試，的確有些樣品不能完全溶解在甲醇或者乙腈中，可是對于分析測試用的樣品濃度來說，樣品不太可能不溶于相同的溶劑中。如果樣品在分析用濃度水平不能溶解的話，它怎么能在分析過程中從色譜柱上被洗脫出來呢？對于極少數情況，樣品在水-有機溶劑中的臨界濃度對其溶解性很重要。但是對于好的液相色譜系統，比較傾向樣品溶解在流動相中，并會被流動相洗脫出來。大多數色譜柱的清洗方法關注的不是樣品如何從色譜柱洗脫下來，而是如何將樣品所帶來的污染物從色譜柱上清洗掉，那么采用強溶劑將是最好的選擇。

可以采取強溶劑沖洗嗎
      有些色譜工作者喜歡用一些洗脫能力比流動相中強溶劑更強的溶劑來清洗色譜柱，例如，在用乙腈沖洗色譜柱后，采用二氯甲烷或甲基叔丁基醚或者DMSO沖洗。的確這樣做可以出去一些強吸附在色譜柱上的污染物，但有時要考慮值不值得。我們從經濟的角度考慮一下：對于制藥行業來說，一般一個LC-UV的分析大約要花費50美元。如果一個價值500美元的色譜柱可以持續運行500次進樣的話，那么每一次進樣花費1美元，是全部花費的2%。如果你用1小時來清洗色譜柱，并使其壽命延長一倍的話，你也只是節約全部費用的1%，這是一種很好的投資嗎？我覺得如果一根色譜柱可以進樣500次的話，就已經很值了。根據經驗，即使是血樣樣品，色譜柱常常能經受2000次進樣或者更多。色譜柱是消耗品，不是固定資產，即使它非常貴也仍然是耗材。